納米PCR試劑盒使用時的注意事項有哪些？

　　納米PCR試劑盒使用的注意事項：
 

　　1、組份A中含有染料，染料的加入不影響PCR反應，反應產物可直接電泳，節省時間。
 

　　2、本試劑盒檢測范圍涵蓋支原體所有種屬，真核細胞和革蘭氏陰性菌不會造成干擾，與支原體親緣關系較近的革蘭氏陽性菌在反應中的靈敏度較支原體低1000-10000倍。
 

　　3、本試劑盒適用于檢測支原體感染，客戶如需區分感染的種屬，可將PCR產物切膠然后測序，進行序列比對即可知種屬類型。
 

　　4、有時可直接用細胞培養上清進行PCR反應。培養上清中常含有高濃度的PCR抑制劑，可能導致假陰性結果，故不建議使用此法。有些PCR抑制劑用離心可以除去，若離心不能去除，則推薦抽提基因組DNA進行PCR。而某些PCR抑制劑。
 

　　5、假陰性結果判斷方法：在測試反應管中同時加入測試樣品和陽性對照樣品，觀察對照條帶是否出現。在陽性對照管出現對照條帶的情況下，如果測試反應管的對照條帶和檢測條帶都沒有出現，則可判斷為PCR反應受到了抑制，即假陰性結果。陽性對照管如果沒有出現對照條帶，請檢查PCR條件是否恰當，或者與技術支持聯系。
 

　　6、每個測試樣品建議做兩個反應：一個與陽性對照樣品共同反應，排除假陰性結果，另一個單獨反應，可避免因加入陽性對照樣品所致的靈敏度降低。如果測試樣品中支原體含量很高，可能會抑制陽性對照條帶的出現。